В отличие от классического ПЦР-анализа ПЦР в реальном времени (количественная ПЦР, Real-time PCR, qPCR) позволяет проводить амплификацию фрагмента ДНК или РНК и детектировать накопление продуктов ПЦР в процессе проведения амплификации, а не в конце реакции.
Технология Real-time PCR – один из ведущих инструментов в биологических исследованиях (выявление патогенов, анализ экспрессии генов, анализ копийности генов, SNP генотипирование и др.). Метод позволяет провести полный анализ пробы за 20-60 минут. Теоретически возможна детекция даже одной молекулы ДНК или РНК в пробе. Так как при ПЦР в реальном времени отсутствует стадия визуализации результатов ПЦР, исключается риск ошибок, связанных с контаминацией.
Метод Real-time PCR предполагает одновременную детекцию и количественное определение специфической последовательности ДНК в образце. Полученные результаты регистрируются и интерпретируются автоматически.
Основные преимущества количественной ПЦР:
Для осуществления количественной ПЦР нужно соответствующее оборудование – ДНК-амплификатор real time. Этот прибор сочетает в себе функции стандартного амплификатора и флуоресцентного детектора. Заказать ДНК-амплификатор с детекцией в режиме реального времени можно в компании Litolab.
ДНК-амплификатор с детекцией real-time осуществляет ПЦР и измеряет изменение флуоресценции в течении реакции. Амплификатор строит график зависимости флуоресценции от номера цикла, отображая накопление продуктов ПЦР за все время реакции.
Приведём основные критерии для выбора ДНК-амплификатора, работающего в реальном времени.
Выпускаются амплификаторы с реакционными блоками разных форматов: 48-луночные для проб на 0,1 мл или 0,2 мл, 96-луночные на 0,1 мл или 0,2 мл, 384-луночные. Самый распространённый формат термоблока – 96-луночный на 0,2 мл. Но и другие варианты востребованы. Так, 48-луночные приборы очень удобны для работы с небольшим количеством образцов. Термоблоки ДНК-амплификаторов бывают заменяемыми и фиксированными.
В амплификаторе может быть разное количество каналов – от двух до шести. Выбирать нужно в зависимости от целей эксперимента – будете ли вы использовать один-два флуорофора или планируете проводить мультиплексную ПЦР.
Скорость влияет на время проведения каждого цикла и всей ПЦР и может варьироваться от 2,5 до 5 градусов в секунду в зависимости от модели амплификатора.
В нашем каталоге представлены надёжные модели ДНК-амплификаторов, среди которых наверняка найдётся та, которая оптимально подходит для решения задач вашей лаборатории.
